3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸在补体蛋白领域中的应用

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2024-04-11

3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸别名3-吗啉-2-羟基丙磺酸,英文名MOPSOCAS68399-77-9分子式C7H15NO5S,是一种两性离子生物缓冲试剂,其结构与MOPS相似,有效的酸碱度范围为6.2-7.6,主要用作生化研究用生物缓冲剂。

 

68399-77-9.png

(3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸结构式)

在补体蛋白领域中,3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸有着重要作用。补体C4是一种多功能β1-球蛋白,存在于血浆中。检测补体C4对于系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病具有诊断和治疗价值。C4降低常见于免疫复合物引起的肾炎、系统性红斑狼疮、病毒性感染、狼疮性症候群、肝硬化、肝炎等。C4含量升高常见于风湿热的急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter综合征和各种类型的多关节炎等。目前,C4主流测定方法是免疫散射比浊法,测定过程中,需要一定浓度和纯度的天然C4作为校准品使用。因此,研究C4的分离纯化方法,可为相关疾病的检测研究提供基础。目前,C4分离方法虽经各方不断改进,但是其分离方法较为繁琐,包括了前处理、透析、离子交换纤维层析、高分辨阴离子层析等,并且均不能得到纯度较高的天然C4蛋白。所以迫切需要开发一种简单高效的C4分离技术,助力补体C4的测定标准化及生物学研究。针对现存问题,CN117304298A专利提供了一种采用纳米抗体分离补体C4天然蛋白的方法。其具体方法如下:

针对正常人的样本,利用沉淀剂获得目的蛋白沉淀,使用缓冲液(为Tris、HEPES、MOPS、CHES和MOPSO中的任一种,并含有一定浓度的盐离子)对含有目的蛋白的沉淀进行重悬;表达后的补体C4纳米抗体结合在镍亲和柱中,重悬的沉淀上样至结合有补体C4纳米抗体的镍亲和柱中,经过平衡、洗脱,即可获取纯度较高的天然补体C4。

由此可见,3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸对补体C4的重要性。本专利方法利用蛋白质分级沉淀,使用低成本的纳米抗体,利用抗原和纳米抗体之间的亲和反应,经过两步操作可以获取目的蛋白,降低了成本。解决了现有技术中纯化C4前处理繁琐的问题。

 

参考文献

CN117304298A 一种采用纳米抗体分离补体C4天然蛋白的方法.














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